CatAce®双链DNA外切酶( CatAce® Exonuclease III)作用于双链 DNA,从 3´ OH 末端方向逐步切去单核苷酸。每次酶与底物结合催化,只有几个核苷酸被除掉,从而在 DNA 分子群内产生渐进式 3’端缺失。尽管可以作用于双链 DNA 的切刻产生单链缺口,但该酶最适底物是平齐末端或 3´ 凹陷末端 DNA。由于对单链 DNA 无活性,因此该酶无法切割 3´ 突出末端。3´ →5´ 外切酶活性对底物的切割程度随 3´ 突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端完全不能被切割。